BD全血RNA管762165正確的使用方法

　　BD全血RNA管762165使用方法：

　　1.將0.2-1.5mL新鮮或解凍后的抗凝全血加入到1.5mL塑料離心管中。

　　2.12，000rpm室溫離心3分鐘，棄上清（血漿）。如果此時血液細胞沉淀體積大于0.2mL，則需要減少血液的使用量，具體減少量需根據具體情況決定，因為各個個體（尤其是患者）血液中白細胞數目差別很大。

　　3.將1mL溶液A加入到血液細胞沉淀中，用移液槍吹打沉淀使細胞裂解。

　　4.將0.3mL的溶液B加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。

　　5.和0.2mL氯仿加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。

　　6.12，000rpm室溫離心3-5分鐘，將上清液（為無色或淺紅色，約0.5-0.9mL）轉移到另一干凈離心管中。為防止污染，建議留100uL左右的上清液。下層有機相一般呈深紅色，中間層為白色，含有DNA，蛋白質和其他細胞破碎物，避免觸及或吸取。

　　7.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自備氯仿，用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。

　　8.室溫12，000rpm離心3分鐘，兩相間將有白色膜狀物（蛋白質）形成。

　　9.將上清液（約1mL）轉移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中，避免觸及或吸取有機相及其上面的白色膜狀物。

　　10.在上清液中加入0.5倍體積的溶液D，用手上下顛倒或振蕩器振蕩30秒混勻。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。

　　BD全血RNA管762165具有下列特點：

　　1.比血液RNAOUT更加簡單快捷，直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品，不需裂解紅細胞等任何預處理步驟，整個提取過程只需要十分鐘左右，可以全在室溫下進行。

　　2.產量和純度更高，OD260/280均在2.0左右，產率一般為2-5ug/mL人血。

　　3.每次微量提取的樣品處理量可以達到1.5mL，高于進口的同類產品。

　　4.與常用的抗凝劑（包括肝素，EDTA，檸檬酸鈉，草酸鈉）兼容，得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern雜交等研究。